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硫苷的全稱是硫代葡萄糖苷，它是十字科蔬菜中的一種次生代謝產(chǎn)物。根據(jù)側(cè)鏈基團(tuán)的不同，可以分為脂肪酸，芳香族，吲哚族。硫苷的側(cè)鏈結(jié)構(gòu)種類比較多，有直碳鏈，支碳鏈，羥基，羰基等。硫苷的側(cè)鏈R基團(tuán)是不同的，當(dāng)R基團(tuán)為甲硫氨酸，丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸和異亮氨酸的時(shí)候，它就是脂肪族硫苷；當(dāng)R基團(tuán)是苯丙氨酸和酪氨酸，為芳香族硫苷；當(dāng)R基團(tuán)為色氨酸時(shí)，為吲哚族硫苷。硫苷降解產(chǎn)物具有一定氣味，具有殺菌殺蟲的作用。

檢測方法，有高效液相色譜（HPLC）法、氣相色譜（GC）法、質(zhì)譜（MS）法、分光光度法等。

以HPLC為例，簡單的介紹一下檢測過程和注意事項(xiàng)。

1.樣品前處理

能不能測定出來樣品中的硫苷，前處理是非常重要的。特別要考慮硫苷的物理和化學(xué)性質(zhì)，參考過去的文獻(xiàn)資料，有效的經(jīng)驗(yàn)，可以獲得相對準(zhǔn)確可靠的方法。當(dāng)然，并不是所有的經(jīng)驗(yàn)都是有效的，就實(shí)際情況來判斷和處理。處理樣品的方法，是大同小異的。相同的是有粉碎，過篩，對應(yīng)的有機(jī)溶劑，水浴，振蕩，超聲，離心，過濾，提取等。不同的是每個(gè)步驟的用量，濃度，時(shí)間，溫度等都需要相對準(zhǔn)確的參數(shù)，這樣才能盡可能將目標(biāo)化合物分離出來。進(jìn)入溶液中，從而有利于后續(xù)的hplc測定含量。這一步是非?；A(chǔ)的，但也是很關(guān)鍵的。如果做不好，很可能會有很少或檢測不出來，從而導(dǎo)致不準(zhǔn)確的判斷。

2.HPLC色譜條件

要對HPLC的結(jié)構(gòu)和參數(shù)都非常的熟悉，比如，測什么化合物，就知道一定會用哪種色譜柱，什么流動(dòng)相和檢測器。如果是做方法開發(fā)，就要做條件優(yōu)化設(shè)計(jì)，參照不同濃度和參數(shù)，得到最優(yōu)化的參數(shù)組合。一般對于過去用過的，做一下方法驗(yàn)證或稍微優(yōu)化點(diǎn)參數(shù)；如果是完全不熟悉的，就要重新設(shè)計(jì)，找到比較適合的色譜柱，流動(dòng)相，檢測器波長等。比如，采用C18的色譜柱，260mm長，4.6mm內(nèi)徑，5um粒徑；以水和乙腈為流動(dòng)相，梯度洗脫，1ml/min；紫外檢測器，229nm；進(jìn)樣量10-20uL。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

使用標(biāo)準(zhǔn)品，溶解定容后，進(jìn)行梯度稀釋5-7個(gè)點(diǎn)，一般選擇6個(gè)濃度點(diǎn)。梯度稀釋，并不是隨意的稀釋，而是要考慮到檢測限。比如，檢測器信噪比的5-10倍為最低點(diǎn)，這樣就可以預(yù)先知道該怎么稀釋。通過6個(gè)不同的濃度，進(jìn)樣到HPLC，測定出來各自的色譜峰。對峰面積進(jìn)行積分處理，結(jié)合對應(yīng)的濃度，用表格函數(shù)，可以得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程，相關(guān)系數(shù)r2需要大于0.999。有的地方，要考慮到回收率，重復(fù)性，精密度等。

4.樣品的測定

對樣品的測定，有的時(shí)候比較順利，有的時(shí)候要考慮流動(dòng)相或色譜柱污染等問題。通過測定出來的色譜峰面積，代入到回歸方程，就能計(jì)算出樣品中的硫苷含量。

分光光度法可以參考GB/T 23890-2009《油菜籽中芥酸及硫苷的測定 分光光度法》