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輔酶Q10的檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-03-17 | 35 次瀏覽 | 分享到:
輔酶Q10是能夠進行有氧呼吸的真核生物中的一種輔酶,又稱為泛醌。Q是醌基,10是尾部接上的異戊二烯的數(shù)量。它是一種苯醌類的脂溶性化合物,在生物體內(nèi)的線粒體內(nèi)膜形成??梢酝ㄟ^食用堅果,橘子,西蘭花等水果蔬菜獲得。輔酶Q10在人體中分布很廣泛,比如組織,血漿等,主要是參與線粒體的氧化磷酸化和ATP的產(chǎn)生,調(diào)控細胞氧化還原,加速細胞的更新?lián)Q代。從藥理機理來看,輔酶Q10具有抗機體衰老,抗疲勞,提高肌肉能量,調(diào)節(jié)免疫的作用。

輔酶Q10是能夠進行有氧呼吸的真核生物中的一種輔酶,又稱為泛醌。Q是醌基,10是尾部接上的異戊二烯的數(shù)量。它是一種苯醌類的脂溶性化合物,在生物體內(nèi)的線粒體內(nèi)膜形成??梢酝ㄟ^食用堅果,橘子,西蘭花等水果蔬菜獲得。輔酶Q10在人體中分布很廣泛,比如組織,血漿等,主要是參與線粒體的氧化磷酸化和ATP的產(chǎn)生,調(diào)控細胞氧化還原,加速細胞的更新?lián)Q代。從藥理機理來看,輔酶Q10具有抗機體衰老,抗疲勞,提高肌肉能量,調(diào)節(jié)免疫的作用。



分子式為C59H90O4,分子量為863.36,其結(jié)構(gòu)類似于維生素K和維生素E,易溶于氯仿、苯、四氯化碳等有機溶劑,微溶于乙醇,不溶于水和甲醇。


檢測樣品中的輔酶Q10的含量,實驗室的方法,主要是通過高效液相色譜(HPLC)來完成的。它包含了樣品前處理,色譜方法,色譜峰(標(biāo)品+樣品),標(biāo)準(zhǔn)曲線,含量計算,方法學(xué)等過程。


1.樣品前處理:精密稱量20mg樣品,加入大約40mL的無水乙醇,在50℃的水浴中溶解振蕩。溶解完成后,拿出來放冷,移到100mL的量瓶中,還是用無水乙醇定容到刻度,待測。



2.色譜條件:C18色譜柱,250mm長,4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑,35℃柱溫;以甲醇-無水乙醇為流動相,等度洗脫,流速1ml/min;紫外檢測器,波長275nm,進樣量20ul,僅供參考。根據(jù)實際情況,需要驗證或重新開發(fā)方法。


3.標(biāo)準(zhǔn)曲線:先用輔酶Q10的標(biāo)準(zhǔn)品,用無水乙醇溶解成0.2mg/mL的溶液。梯度稀釋6個濃度點,記錄濃度值。進樣到hplc測色譜峰,對測出來的色譜峰面積進行積分處理。通過excel函數(shù),將峰面積和對應(yīng)濃度組合起來,繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,得到回歸方程,r2需要大于0.999,確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。


4.含量計算:前面的所有步驟,都是鋪墊。樣品的測定,才是正戲。將樣品進行必要的稀釋,進樣到hplc中,用和標(biāo)準(zhǔn)品同樣的色譜條件,測出來輔酶Q10的色譜峰。其實,每個物質(zhì)的出峰時間是相接近的,可以判斷出樣品的輔酶Q10的位置,對峰面積進行積分。根據(jù)峰面積,和回歸方程,計算出樣品中的輔酶Q10含量。


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